流式抗體用于分選實驗時,需要滿足哪些特殊要求?廠家能否提供適用于細胞分選的流式抗體產品?
日期:2025-12-18 16:13:31
流式抗體用于細胞分選實驗時,需貼合活細胞后續培養需求、分選設備運行特點及實驗準確性要求,滿足無菌、無細胞毒性成分等諸多特殊要求,且市面上多個主流抗體廠家均有適配該實驗的流式抗體產品,具體信息如下:
穩定的抗體活性:抗體需在實驗條件下保持穩定的結合活性,避免因活性下降導致熒光信號減弱,使得目標細胞難以被準確識別和分選。而且抗體的活性需具備批間一致性,防止不同批次抗體導致分選結果出現較大波動,方便實驗結果的重復與對比。
流式抗體用于分選實驗的特殊要求
無細胞毒性添加成分:疊氮鈉是流式抗體中常見的防腐劑,但它對細胞具有毒性,若分選后的細胞需繼續培養,殘留的疊氮鈉會抑制細胞增殖甚至導致細胞死亡,所以分選用流式抗體必須無疊氮鈉。同時,還需避免含其他細胞毒性成分,像部分強效防腐劑等也不能存在于抗體試劑中。另外,部分廠家抗體中含有的甘油,可能會影響細胞活性和分選效果,這類成分也需盡量去除。
符合無菌標準:分選后的細胞常需開展后續培養、功能驗證等實驗,若抗體攜帶細菌、真菌等微生物,不僅會污染分選得到的目標細胞,導致實驗失敗,還可能污染流式分選設備的管路和流路系統,進而影響后續其他實驗樣本。因此,用于分選的流式抗體必須經過嚴格的無菌處理與驗證。
優異的特異性與低背景干擾:抗體需能精準結合目標細胞的抗原,避免與非目標細胞產生交叉反應,否則會導致分選得到的細胞純度下降。同時要降低非特異性結合帶來的背景熒光干擾,因為流式分選依靠熒光信號識別目標細胞,背景熒光過強會干擾儀器對信號的判斷,出現假陽性分選結果。例如針對T細胞分選的CD3抗體,需僅特異性結合T細胞表面CD3抗原,不與B細胞、NK細胞等發生非特異性結合。
適配儀器的熒光標記特性:抗體的熒光標記要和流式分選儀的配置匹配,熒光素的激發光譜需與儀器激光器波長相契合,發射光譜要適配儀器的濾光片通道,這樣才能保證儀器精準捕獲熒光信號。并且多色分選時,所選抗體的熒光素之間要減少光譜重疊,不然會增加熒光補償調節難度,干擾分選判斷。比如常用的4色熒光搭配對應的抗體(FITC標記抗體、PE標記抗體等),就是為了減少這種光譜干擾。

穩定的抗體活性:抗體需在實驗條件下保持穩定的結合活性,避免因活性下降導致熒光信號減弱,使得目標細胞難以被準確識別和分選。而且抗體的活性需具備批間一致性,防止不同批次抗體導致分選結果出現較大波動,方便實驗結果的重復與對比。






