先導(dǎo)抗體分子發(fā)現(xiàn)服務(wù)
抗體藥以細胞、基因工程技術(shù)為主體的抗體工程技術(shù)進行制備，與靶抗原結(jié)合具有高特異性、有效性和安全性，臨床用于惡性腫瘤與自身免疫疾病等重大疾病，是發(fā)展迅速的生物制劑藥物，近年來成為新藥開發(fā)中主要的類別。
抗體藥的研發(fā)，從最初的確定靶點，到篩選先導(dǎo)分子，做臨床前研究，再到進入臨床1/2/3期試驗，以及完成最后的NDA申報，整個流程至少需要耗費10年的時間。在整個抗體藥物研發(fā)過程中，治療性抗體的發(fā)現(xiàn)是抗體藥物開發(fā)的最初階段，也是至關(guān)重要的。
華美生物18年來一直致力于蛋白質(zhì)和抗體的研發(fā)和生產(chǎn)，并且已經(jīng)成功地為多家制藥公司篩選了100多個治療性抗體候選物，其中許多已經(jīng)進入了CMC或IND階段。對于一些具有挑戰(zhàn)性的靶點，包括CLDN18.2、CLDN6、CCR8、SSTR2、DLL3、LY6G6D、ROR1、SEMA4D、GPC3、CD16A等，我們不僅成功生產(chǎn)了抗原，還成功篩選出相應(yīng)的重組抗體。
華美生物擁有5大蛋白表達系統(tǒng)，針對多次跨膜蛋白表達的三大技術(shù)平臺（VLPs、去垢劑、Nanodisc），針對小分子量蛋白表達的Nanoparticle平臺，已成功完成30多個針對多次跨膜蛋白的篩選服務(wù)項目。優(yōu)秀的抗原制備技術(shù)平臺以及豐富的抗體篩選經(jīng)驗，保證了華美生物可為您提供從目標到治療性抗體候選物的一站式解決方案，加快整個藥物開發(fā)進程。
服務(wù)流程
一、原材料準備
● 抗原制備
華美生物擁有18重組蛋白表達經(jīng)驗，可提供從基因合成、載體構(gòu)建到蛋白表達及純化的一站式服務(wù)。針對藥靶蛋白，在原有的五大重組蛋白表達系統(tǒng)（大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞、哺乳動物細胞和無細胞蛋白表達系統(tǒng)）的基礎(chǔ)上，經(jīng)過不斷探索與優(yōu)化，華美生物現(xiàn)已推出四大優(yōu)勢藥靶蛋白表達平臺，分別是病毒樣顆粒 (VLPs) 技術(shù)平臺、去垢劑技術(shù)平臺、Nanodisc技術(shù)平臺和Nanoparticle 表達平臺。
- 展示多次跨膜蛋白的天然構(gòu)象，具有完整生物活性
- 可提高免疫原性，打破機體自身的免疫耐受
- 包膜VLPs中靶抗原豐度高于過表達細胞
- 大小為100-150nm，是噬菌體展示的最佳靶點
- 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI，助力先導(dǎo)抗體發(fā)現(xiàn)
- 近似于細胞膜環(huán)境，展示完整構(gòu)象，保持生物活性
- 不含去垢劑，適用于對去垢劑有干擾的實驗
- 可直接用于噬菌體篩選（提供空nanodisc反篩）
- 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細胞實驗
- 可全長表達多次跨膜蛋白，不僅僅只限于ECD表位
- 可精確定量，區(qū)別于VLPs和Nanodisc平臺
- 可應(yīng)用于免疫/ELISA/SPR/BLI
- 展示天然構(gòu)象，具有完整生物活性
- 可增強免疫反應(yīng)
- 可直接用于噬菌體篩選（提供空的Nanoparticle反篩）
- 可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細胞實驗
● 陽性抗體制備
陽性抗體又稱藥物對照抗體，通常用于檢測抗原或穩(wěn)定細胞株，以確定抗原或穩(wěn)定細胞株是否合格。此外，它還可作為篩選FACS（熒光激活細胞分選）抗體的對照。陽性抗體的優(yōu)先順序如下：上市的抗體藥物，臨床階段（Ⅰ-Ⅲ）的抗體藥物，臨床前階段的抗體藥物，以及FACS抗體。
● 穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株是指通過穩(wěn)定轉(zhuǎn)導(dǎo)持續(xù)穩(wěn)定表達或干擾特定基因表達的細胞系。在抗體開發(fā)領(lǐng)域，穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株可以作為免疫原刺激動物的特異性免疫反應(yīng)，可針對多跨膜蛋白的靶點。此外，穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株廣泛用于抗體結(jié)合和功能篩選實驗。華美生物可提供穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建服務(wù)，具體服務(wù)內(nèi)容如下：
| 慢病毒包裝構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞服務(wù) | |||
| 序列 | 步驟 | 服務(wù)內(nèi)容 | 周期 |
|---|---|---|---|
| 1 | 表達載體構(gòu)建 | 密碼子優(yōu)化、全基因合成、構(gòu)建慢病毒表達載體，質(zhì)粒大抽 | 2-3周 |
| 2 | 慢病毒包裝 | 將表達載體和輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)293T細胞，進行慢病毒包裝 | 1-2周 |
| 3 | Cell pool篩選及驗證 | 用相應(yīng)篩選劑篩選出陽性細胞，檢測cell pool表達量 | 1-2周 |
| 4 | 單克隆篩選及驗證 | 單細胞進行鋪板，并驗證單克隆表達量 | 3-4周 |
| 5 | 單克隆凍存及QC | 單克隆擴大培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇檢測活率及微生物污染 | 1-2周 |
| 總時間 | 8-12周 | ||
二、小鼠免疫
三、抗體篩選
華美生物具有十八年豐富雜交瘤單抗開發(fā)經(jīng)驗，技術(shù)路線成熟，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，高成功率。初步陽性率高達20%-40%左右，流式陽性率達到10%-20%左右，可滿足不同類型客戶需求。
四、質(zhì)控（抗體功能檢測）
針對篩選獲取的先導(dǎo)分子抗體，華美生物會根據(jù)客戶需求進一步做抗體功能檢測，包括抗原ELISA、細胞FACS、抗原SPR及抗原binning檢測?？乖璄LISA和抗原SPR主要檢測抗原抗體的結(jié)合活性與親和力，細胞FACS檢測抗體與細胞的結(jié)合活性，抗原binning檢測鑒定篩選的先導(dǎo)抗體分子和陽性抗體識別的抗原表位是否一致。
五、交付
華美生物可以保證所生產(chǎn)的抗體能夠在穩(wěn)定細胞株中成功應(yīng)用于FACS（熒光激活細胞分選）實驗。根據(jù)客戶的需求，我們可以提供前50個或更多的序列。
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