多克隆抗體制備中,不同動物宿主的免疫應答差異是什么?
日期:2025-12-24 13:52:05
在多克隆抗體制備中,兔、羊、鼠、雞等不同動物宿主的免疫應答差異,主要源于物種的進化地位、免疫系統發育特點、抗體生成機制的不同,具體差異體現在抗體產量、抗體多樣性、免疫反應強度、抗體類型等多個方面:
1、小鼠
免疫應答特點:小鼠屬于嚙齒類,免疫系統對多數抗原(尤其是蛋白類抗原)的反應速度快,初次免疫后抗體產生周期短(約7–10天可檢測到抗體),但抗體多樣性相對有限。
產量與效價:小鼠體型小,單次采血體積有限(眼眶采血或斷尾采血僅能獲取少量血清),多克隆抗體總產量低,適合小批量制備或預實驗。
抗體類型:主要產生IgG類抗體,亞類以IgG1、IgG2a為主,針對不同抗原的亞類偏向性不同(如針對病毒抗原易產生IgG2a)。
適用場景:快速篩選抗原免疫原性、制備用于ELISA包被或WB檢測的小型抗體試劑,也常用于后續單克隆抗體制備的親本免疫。

2、兔
免疫應答特點:兔是多克隆抗體制備的最常用宿主之一,免疫系統對多種抗原(包括蛋白、多肽、小分子半抗原)的應答都很強,抗體多樣性豐富,且能對一些保守性高的抗原產生有效免疫。
產量與效價:兔的采血體積適中(耳緣靜脈采血單次可獲10–20mL血清),抗體效價高(抗血清效價常可達1:10^4–1:10^6),總產量高于小鼠,適合常規實驗用多抗制備。
抗體類型:主要產生IgG類抗體,兔IgG不存在明顯亞類分化,且抗體親和力較高,適合免疫沉淀、免疫組化等多種實驗。
適用場景:大部分科研實驗的多克隆抗體制備,尤其是需要高親和力、高特異性抗體的場景。
3、羊
免疫應答特點:羊屬于反芻動物,體型大,免疫系統對大分子抗原的應答持久且穩定,免疫后抗體維持時間長,適合需要長期采血制備大量抗體的需求。
產量與效價:羊的采血體積大(頸靜脈采血單次可獲100–500mL血清),多克隆抗體總產量遠高于兔和小鼠,抗體效價穩定,可通過多次加強免疫持續獲得高濃度抗血清。
抗體類型:主要產生IgG類抗體,存在IgG1和IgG2兩個亞類,其中IgG2易與蛋白A結合,IgG1易與蛋白G結合,純化時需注意選擇適配的親和介質。
適用場景:大規模制備多克隆抗體,如工業級診斷試劑、抗體藥物的原料制備,或需要大量抗體進行長期實驗的場景。
4、雞
免疫應答特點:雞屬于鳥類,免疫系統與哺乳類差異較大,其抗體生成機制獨特,對哺乳類保守抗原的免疫原性更強(不易產生免疫耐受),適合制備針對高度保守蛋白的抗體。
產量與效價:雞的抗體主要存在于卵黃中,而非血清,通過收集雞蛋即可獲取抗體,無需采血,對動物損傷小,單次產卵可提取數毫克卵黃抗體(IgY),長期收集的總產量較高。
抗體類型:產生的抗體為IgY,而非哺乳類的IgG,IgY不與蛋白A/G結合,也不激活哺乳類補體系統,在免疫組化、流式細胞術等實驗中背景干擾更低。
適用場景:制備針對哺乳類保守抗原的抗體、無血清抗體制備、活體動物體內被動免疫實驗(避免補體激活引發的副作用)。
此外,不同動物的免疫耐受閾值也有差異:小鼠對小分子半抗原的耐受概率較高,需偶聯載體蛋白才能誘發免疫;而兔、羊對載體偶聯的半抗原應答更靈敏;雞則對哺乳類自身抗原的耐受程度最低,更容易產生特異性抗體。




