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ULBP1蛋白:NKG2D配體潛力成員,多種血液和實體腫瘤CAR-T治療靶點!

日期:2023-04-28 09:20:13


近日,一篇發表在血液瘤《The Lancet Haematology》知名雜志的研究報道,多劑CYAD-01治療反復發作/難治性急性髓性白血病(AML)、骨髓增生異常綜合征(MDS)或多發性骨髓瘤(MM)患者,顯示出一定程度的療效和安全性 [1]。CYAD-01是一種基于NKG2D受體的CAR-T細胞治療,NKG2D受體可以識別表達在大多數實體瘤和血癌細胞表面的8種不同的配體(MICA、MICB;ULBP1-ULBP6),導致它可以同時靶向多種不同的癌癥。

NKG2D配體(NKG2D Ligands,NKG2DL)在廣泛的血液惡性腫瘤中過表達。據CYAD-01的I期臨床數據顯示,通過CAR T細胞療法靶向NKG2D配體可提高對這些腫瘤的治療效果。ULBP1,作為NKG2D配體成員之一,在多種血液和實體腫瘤中高表達,使用NKG2D CAR-T靶向方法,有望增強對高表達ULBP1的腫瘤細胞的抗腫瘤活性。今天,我們一起探究ULBP1作為NKG2D配體潛力成員,在癌癥治療中的新機遇!

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1. 什么是NKG2D Ligands家族蛋白?

NKG2D ligands(NKG2DLs)家族蛋白即NKG2D所識別的配體,主要包括六種巨細胞病毒UL16結合蛋白1-6(ULBP1ULBP2、ULBP3、ULBP4、ULBP5、ULBP6)和MHC I鏈相關分子A和B(MICAMICB[2]。正常情況下,NKG2DLs在健康細胞表面表達相對較低。當細胞發生應激,例如在感染或惡性轉化,NK細胞就能通過NKG2D-NKG2DLs形式結合并殺傷應激細胞(圖1[3]

大量研究已證實,NKG2D/NKG2DL軸參與NK細胞的抗腫瘤作用。因而,NKG2DLs成為腫瘤免疫治療的分子潛力靶點。事實上,鑒于NKG2D配體在腫瘤組織表達的特異性,目前已開發出基于靶向NKG2D配體的CAR-T療法,該CAR-T在臨床前和臨床試驗中被應用于腫瘤的治療,展現出了優越的抗腫瘤效果和良好的安全性 [4]

NKG2DL在腫瘤中高表達

圖1. NKG2DL在腫瘤中高表達 [3]


2. 什么是ULBP1?

UL16結合蛋白-1(UL16-binding protein 1,ULBP1)是NKG2D ligand家族蛋白的成員之一,亦稱NKG2DL,屬于MHC-I類相關分子的新家族。ULBP1編碼基因位于6q24.2-6q25.3。ULBPs都具有相似的結構特征,包括一個信號肽序列、一個α1域、一個α2域和一個細胞膜錨定區域 (圖2[5]。ULBP1-4不含跨膜結構域,只能通過GPI與細胞膜相連。各ULBPs分子與受體NKG2D的親和力不同。ULBP1蛋白可以通過結合NKG2D激活NK細胞、CD8+ T細胞和γδT細胞,從而參與免疫監視和免疫清除的過程。已有研究證實,NKG2D和ULBP1配體在多種腫瘤中相互作用,在免疫細胞靶向并殺傷細胞中起重要作用 [6]

人和鼠NKG2D ligands的結構

圖2. 人和鼠NKG2D ligands的結構 [5]


3. ULBP1在NKG2D/NKG2DL系統中的作用機制

大量研究已揭示,NKG2D/NKG2DL系統在腫瘤免疫治療中扮演重要作用。該系統可誘導癌細胞表達NKG2DL,使得這些細胞易受NK細胞殺傷,充分說明NKG2D/NKG2DL系統在腫瘤免疫排斥和監測中的作用,使該系統成為免疫治療的重要靶點(點擊查看“NKG2D,一個極具潛力的CAR-T和CAR-NK靶點”相關報道文章)。然而,NKG2DL誘導所涉及的機制在很大程度上是未知的。

為了解誘導癌細胞表達NKG2DL的機制,一項研究首次報道了ULBP1基因轉錄的調節功能特征。研究表明,Sp3Sp1在ULBP1啟動子活性和蛋白質表達中發揮著重要作用。這些轉錄因子在體外和體內都能與位于ULBP1基因最小啟動子的CRE(1)位點結合,證明了ULBP1的表達嚴格依賴于Sp1/Sp3的活性 [7]

此外,在HeLa和HEK293細胞中,突變或刪除Sp1/Sp3結合位點會幾乎完全抑制ULBP1啟動子的活性,進而影響對癌細胞或感染細胞的免疫反應。研究結果還表明,ULBP1的表達可能受AP-2α的調節,AP-2α下調HeLa細胞中ULBP1的表達(圖3[7]

另有研究發現,丙型肝炎病毒蛋白NS3/4A抑制了ULBP1啟動子的活性,并且這一抑制作用隨著NS3/4A表達量的增加而增加 [8]。此外,IL15可通過激活NK細胞ULBP1/NKG2D信號,抑制食管癌細胞的遷移和侵襲 [9-10]

ULBP1轉錄調控模型

圖3. ULBP1轉錄調控模型 [7]


4. ULBP1在腫瘤中的作用

NKG2DL的表達在特定腫瘤或感染細胞中存在顯著差異,也就是說,不同的刺激或病理狀態可能引起不同NKG2DL的表達。陸續研究表明,ULBP1在多種類型的腫瘤細胞,包括白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、肺癌和胃癌等表達上調 [11-13]。ULBP1與NK細胞和T細胞上的NKG2D的相互作用可以激活它們對腫瘤細胞的細胞毒性活動。

在原發性神經膠質瘤細胞中,存在MICA和ULBP1、ULBP2、ULBP3表達,但極少表達MICB [14-15]。在原發性白血病和惡性黑色素瘤中,主要表達ULBP分子。在卵巢癌細胞中,MICA、ULBP1、ULBP3低水平表達,而ULBP2表達水平較高 [16-17]

在卵巢癌和頭頸部鱗癌中,ULBP1表達水平與患者生存率呈正相關 [18-20];而在結直腸癌和胰腺癌中,ULBP1表達水平與患者生存率呈負相關 [21-22]。進一步研究提示,p53可以明顯上調人NKG2D配體ULBP1、ULBP2在腫瘤細胞表面的表達,進而增強NK細胞的殺傷作用 [23]

在白血病或淋巴瘤中,存在非常廣泛的ULBP1表達水平。研究人員發現,淋巴瘤細胞表達高水平的ULBP1時更容易被γδ T細胞攻擊。在不同的淋巴瘤患者中,ULBP1的表達水平存在很大差異,提示ULBP1可作為生物標志物,預測哪些患者會對γδ T細胞免疫療法產生良好的反應 [24]


5. ULBP1的臨床在研藥物

目前,一些針對ULBP1的臨床在研藥物已經進入到臨床試驗階段 (表1)。例如,美國Celyad公司開發的靶向ULBP1的CAR-T藥物(CYAD-01,又名CAR-T NKG2D)已處于臨床2期。早期臨床數據已顯示,CYAD-01在針對復發難治性AML的臨床試驗中,出現第一個CR(完全緩解)的患者,其結果令人振奮。此外,抗ULBP1單抗也處于早期開發階段,預計未來幾年將進入臨床試驗。這些基于NKG2D/NKG2DL系統的靶向藥物的成功研發和應用,將為血液腫瘤治療提供新的方向和希望!

藥物名稱 靶點 作用機制 藥物類型 在研適應癥 在研機構 全球最高研發狀態
CYAD-01 ULBP1 ULBP1調節劑 CAR-T 骨髓增生性疾病;
急性髓性白血病;
多發性骨髓瘤;
骨髓增生異常綜合征;
結直腸癌;
結腸癌肝轉移;
結腸癌
Dartmouth College;Ono Pharmaceutical Co., Ltd.;Celyad Oncology SA 臨床2期
Anti-NKG2DL gamma delta CAR-T cell therapy ULBP1 T淋巴細胞替代物;基因轉移;ULBP1抑制劑 CAR-T 結直腸癌;鼻咽癌;腫瘤;前列腺癌;肉瘤;胃癌 CytoMed Therapeutics Ltd. 臨床1期
KYK-2.0 IgG1 (NCI) ULBP1 ULBP1抑制劑 ULBP1抑制劑 / / 藥物發現

表1. ULBP1臨床研究進展

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參考文獻:

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[23] Textor, Sonja, et al. "Human NK Cells Are Alerted to Induction of p53 in Cancer Cells by Upregulation of the NKG2D Ligands ULBP1 and ULBP2ULBP1 and ULBP2 Are Direct p53 Target Genes." Cancer research 71.18 (2011): 5998-6009.

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