標(biāo)簽內(nèi)參抗體開封后反復(fù)凍融，會對其檢測性能產(chǎn)生什么影響？
日期：2025-12-15 11:38:14
標(biāo)簽內(nèi)參抗體開封后反復(fù)凍融，會顯著降低其抗原結(jié)合活性，同時增加非特異性信號，直接影響WB、IHC等實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。
2、非特異性結(jié)合增加
3、實驗重復(fù)性變差
二、關(guān)鍵注意事項
一、反復(fù)凍融對抗體性能的核心影響
1、抗體蛋白構(gòu)象破壞與聚集
抗體屬于蛋白質(zhì)，反復(fù)的冷凍和融化過程會破壞其空間構(gòu)象。
構(gòu)象改變會直接影響抗原結(jié)合位點的結(jié)構(gòu)，降低抗體與靶標(biāo)蛋白的親和力。
部分抗體還會發(fā)生聚集，形成不溶性沉淀，導(dǎo)致有效抗體濃度下降。
2、非特異性結(jié)合增加
構(gòu)象受損的抗體會暴露出更多疏水位點，容易與膜上的雜蛋白、載體結(jié)合。
這會造成WB實驗背景加深、雜帶增多，IHC實驗出現(xiàn)非特異性染色。
3、實驗重復(fù)性變差
每次凍融都會造成部分抗體失活，導(dǎo)致不同批次實驗中有效抗體濃度不一致。
表現(xiàn)為條帶亮度忽高忽低、定量結(jié)果偏差大，無法進(jìn)行可靠的半定量或定量分析。
二、關(guān)鍵注意事項
抗體開封后應(yīng)立即分裝為單次使用的小體積，避免整管反復(fù)凍融。
分裝后的抗體建議-20℃或-80℃保存，短期使用的工作液可4℃保存并在1–2周內(nèi)用完。
若抗體出現(xiàn)明顯渾濁、沉淀，說明已嚴(yán)重失活，不建議繼續(xù)使用。
