試劑盒所采用的抗原/抗體包被方式如何影響檢測的特異性與靈敏度?不同包被方式的適用靶點類型有何差異??
日期:2025-11-10 15:54:45
包被方式通過改變抗原/抗體的結合效率、位點暴露狀態及非特異性反應概率,直接影響檢測的特異性與靈敏度,且不同方式對靶點的結構、豐度和性質有明確適配傾向。
一、直接包被:簡單穩定,適配高活性靶點
特異性:較高,無需中間結合步驟,減少了非特異性交叉反應的發生。
靈敏度:中等,抗原/抗體直接固定在固相表面,部分結合位點可能被固相載體屏蔽,影響結合效率。
適用靶點:分子結構穩定、活性易保持的抗原或抗體,比如純化的重組蛋白抗原、高純度單克隆抗體。

二、間接包被:信號放大,適配低豐度靶點
特異性:中等,引入二抗作為信號放大載體,二抗可能與樣本中其他成分發生非特異性結合,需嚴格篩選特異性二抗。
靈敏度:較高,單個一抗可結合多個攜帶標記分子的二抗,實現信號放大,能檢出低濃度靶點。
適用靶點:豐度低的抗原、難以直接標記的抗體,或需要強化信號的檢測場景,比如微量血清蛋白、低表達細胞因子。
三、捕獲包被:精準富集,適配構象敏感靶點
特異性:最高,采用雙抗體夾心模式,捕獲抗體與檢測抗體分別識別靶點的不同表位,僅對完整靶點分子產生特異性反應。
靈敏度:高,捕獲抗體可高效富集樣本中的靶點,減少基質干擾,結合信號放大效應,檢測下限更低。
適用靶點:具有多個抗原表位的大分子抗原、易降解或構象敏感的靶點,比如完整病毒顆粒、天然蛋白復合物、構象依賴型抗原。






