標(biāo)準(zhǔn)的ELISA檢測(cè)試劑盒通常包含哪些基礎(chǔ)組分？
日期：2025-10-20 15:38:46
標(biāo)準(zhǔn)ELISA檢測(cè)試劑盒的基礎(chǔ)組分主要圍繞“抗原-抗體特異性結(jié)合”和“信號(hào)檢測(cè)”兩大核心，通常包含五大類(lèi)關(guān)鍵試劑。
一、核心特異性結(jié)合試劑
這類(lèi)試劑是ELISA特異性的保障，直接決定檢測(cè)目標(biāo)。
包被抗體/抗原：已預(yù)先包被在酶標(biāo)板孔內(nèi)，或單獨(dú)提供需自行包被。其作用是特異性捕獲樣本中的目標(biāo)分析物（抗原或抗體）。
檢測(cè)抗體：通常為特異性識(shí)別目標(biāo)分析物的二抗，部分試劑盒會(huì)直接提供酶標(biāo)抗體（已偶聯(lián)酶）。
酶標(biāo)記物：若檢測(cè)抗體未偶聯(lián)酶，會(huì)單獨(dú)提供酶（如辣根過(guò)氧化物酶HRP、堿性磷酸酶AP）及對(duì)應(yīng)的偶聯(lián)試劑，或直接提供酶標(biāo)二抗。
二、信號(hào)檢測(cè)與顯色試劑
這類(lèi)試劑用于將“抗原-抗體結(jié)合”的免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)化為可觀察的顏色信號(hào)。
底物溶液：與酶標(biāo)記物特異性反應(yīng)并產(chǎn)生顏色變化的化學(xué)物質(zhì)。例如HRP常用TMB（3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺），AP常用pNPP（對(duì)硝基苯磷酸酯）。
終止液：用于終止底物與酶的反應(yīng)，固定顏色信號(hào)，便于后續(xù)讀數(shù)。常用的有硫酸溶液（針對(duì)HRP-TMB系統(tǒng)）。
三、樣本與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照
這類(lèi)試劑用于定量分析和實(shí)驗(yàn)有效性驗(yàn)證。
標(biāo)準(zhǔn)品：已知濃度的目標(biāo)分析物，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，推算樣本中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。通常提供多個(gè)梯度濃度。
質(zhì)控品（QC）：分為陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照，用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)過(guò)程是否正常、試劑是否有效。
陽(yáng)性對(duì)照：含已知濃度目標(biāo)分析物，應(yīng)出現(xiàn)陽(yáng)性信號(hào)。
陰性對(duì)照：不含目標(biāo)分析物，應(yīng)無(wú)信號(hào)或信號(hào)極低。
四、洗滌與緩沖試劑
這類(lèi)試劑用于去除非特異性結(jié)合物，減少背景干擾。
洗滌緩沖液（WashBuffer）：通常為含吐溫-20的磷酸鹽緩沖液（PBS-T），用于清洗酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的試劑和樣本雜質(zhì)。
樣本稀釋液（SampleDiluent）：用于稀釋樣本，使其濃度落在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，同時(shí)維持反應(yīng)體系的pH和離子強(qiáng)度。
五、輔助耗材
部分試劑盒會(huì)配套提供實(shí)驗(yàn)必需的耗材，方便直接使用。
預(yù)包被的酶標(biāo)板：通常為96孔聚苯乙烯板，已完成包被抗體/抗原的步驟。
封板膜：防止孵育過(guò)程中液體蒸發(fā)和交叉污染。
