elisa洗板的作用是什么？如何正確洗板？

日期：2025-04-11 10:03:00

洗板的作用是去除未結(jié)合的抗原、抗體和其他雜質(zhì)，減少非特異性反應(yīng)，提高檢測的特異性和準確性。洗板時一般使用洗板機，按照試劑盒說明書的要求設(shè)置洗板參數(shù)，包括洗滌次數(shù)、洗滌液體積和浸泡時間等。如果沒有洗板機，也可以采用手工洗板的方法，但要注意洗滌充分，避免殘留雜質(zhì)影響結(jié)果。每次洗板后要盡量吸干孔內(nèi)的液體，可以將微孔板倒扣在吸水紙上輕輕拍打，以去除殘留液體。

ELISA洗板的作用主要是去除未結(jié)合的物質(zhì)，包括未反應(yīng)的抗原、抗體、酶標物以及其他雜質(zhì)，以減少非特異性信號，提高檢測的特異性和準確性。正確洗板的方法如下：

準備洗液：根據(jù)試劑盒說明書的要求配制洗液，一般使用含有吐溫 - 20 等表面活性劑的磷酸鹽緩沖液（PBS）。確保洗液的濃度和 pH 值準確，并且現(xiàn)用現(xiàn)配，以保證洗液的有效性。

加洗液：將適量的洗液加入到酶標板的每個孔中。加液量要準確且均勻，一般每孔加入 200 - 300μL 洗液，以確保孔內(nèi)的液體能夠充分覆蓋反應(yīng)表面。可以使用多通道移液器或洗板機進行加液操作，以提高加液的效率和準確性。

浸泡與孵育：加入洗液后，讓酶標板在室溫下浸泡一段時間，通常為 1 - 5 分鐘。浸泡過程中，洗液中的表面活性劑可以幫助溶解和去除未結(jié)合的物質(zhì)。孵育時間不宜過長，否則可能會導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物解離。

棄去洗液：浸泡結(jié)束后，將酶標板中的洗液徹底棄去。可以將酶標板倒扣在吸水紙上，輕輕拍打，使孔內(nèi)的洗液盡可能流盡。也可以使用洗板機的抽吸功能將洗液吸出，但要注意避免吸頭接觸到孔底，以免刮傷孔內(nèi)的包被物或吸附已結(jié)合的物質(zhì)。

重復(fù)洗滌：按照上述步驟，重復(fù)洗滌 3 - 5 次，以確保充分去除未結(jié)合的物質(zhì)。每次洗滌后都要盡量將洗液棄盡，避免殘留的洗液影響下一次的洗滌效果或干擾后續(xù)的檢測。

最后一次洗滌后處理：最后一次洗滌棄去洗液后，可將酶標板在吸水紙上用力拍干，或者使用吹風(fēng)機的冷風(fēng)檔吹干，以去除孔內(nèi)殘留的水分。但要注意避免使用過熱的風(fēng)，以免影響酶標板上的抗原抗體活性。

如果使用洗板機洗板，需要提前根據(jù)酶標板的規(guī)格和洗液的用量進行參數(shù)設(shè)置，并在洗板過程中觀察洗板機的運行情況，確保洗板程序正常進行。同時，要定期對洗板機進行維護和校準，保證其加液和吸液的準確性。此外，手工洗板時要注意操作的規(guī)范性和一致性，以減少實驗誤差。