外泌體超速離心法提取過程
日期:2023-09-27 15:27:00
外泌體超速離心法是常用的外泌體提取方法。以下是外泌體超速離心法的提取過程:
樣本收集:收集待處理的生物樣本,如細胞培養上清液、血漿、尿液等含有外泌體的樣本。
前處理:將收集到的樣本進行前處理,包括去除細胞碎片、細胞核和大顆粒物質。這可以通過低速離心(如300g)獲取上清液。

超速離心:將上清液轉移到聚乙烯醇/葡聚糖等密度梯度溶液中,并進行超速離心。超速離心的條件可以根據具體實驗設定,通常在1萬到10萬g之間離心30分鐘至2小時。
液體收集:將超速離心后的上清液小心地收集至離心管底部。此時,外泌體富集在密度梯度溶液的底部層。
洗滌:使用緩沖溶液PBS對外泌體進行一至多次洗滌步驟,以去除梯度溶液殘留和雜質。
再次離心:將洗滌后的外泌體懸浮液進行再次超速離心,以沉淀外泌體。
上清液去除:去除上清液,將外泌體沉淀物留在離心管底部。
重懸:將外泌體沉淀物用適當的緩沖液重新懸浮,如PBS。
儲存或進一步分析:根據實驗需要,可以將提取得到的外泌體樣品進行儲存或進行進一步的分析和實驗。
外泌體提取的具體條件和步驟可能因實驗設計的不同而有所差異。因此,在具體操作時,建議參考相關研究文獻或專業實驗方法來進行操作。
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