大腸桿菌表達系統的優缺點
日期:2023-08-28 15:51:00
大腸桿菌表達系統是最常用的原核表達系統之一,具有以下優點和缺點:
大腸桿菌表達系統的優點:
高表達水平:大腸桿菌表達系統能夠實現高水平的目標蛋白表達。大腸桿菌細胞具有強大的代謝能力和豐富的細胞機制,使其能夠高效地合成和折疊蛋白質。
便捷和經濟:相對于其他表達系統,大腸桿菌表達系統操作簡單、成本低廉。菌株培養和蛋白表達周期較短,適用于快速大規模生產。
可調控性:大腸桿菌表達系統可以通過選擇合適的啟動子和誘導劑,調控目標基因的表達水平。這使得研究人員能夠根據需要靈活地控制表達量和時間。
易于遺傳工程:大腸桿菌的基因組信息豐富,具有先進的遺傳工程技術。通過遺傳操作,可以構建改造菌株,增強表達性能、改善折疊能力等,提高目標蛋白的表達水平和純度。

大腸桿菌表達系統的缺點:
蛋白質折疊問題:大腸桿菌是一種原核細胞,其細胞內環境與真核細胞存在差異。某些復雜蛋白質(如糖基化蛋白)或需復雜結構形成的蛋白質在大腸桿菌中可能無法正確折疊,導致表達產物不具功能性。
內毒素產生:大腸桿菌表達系統中,細胞壁內毒素(endotoxin)的產生是一個潛在問題。當大量目標蛋白表達時,內毒素的積累可能導致細胞毒性,并對目標蛋白的純化和功能造成困擾。
限制于溶解態蛋白質:大腸桿菌表達系統主要適用于溶解態蛋白質表達,對于聚集態或難溶性蛋白質的表達可能存在困難。
有限的翻譯后修飾:大腸桿菌表達系統無法進行某些特定的翻譯后修飾,如糖基化、磷酸化等。這對于某些蛋白質的結構和功能可能具有重要影響。
在選擇表達系統時,需要根據特定的目標蛋白質性質、表達需求和項目限制等因素進行綜合權衡。
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