大鼠單克隆抗體的制備原理
日期:2023-09-13 13:36:00
大鼠單克隆抗體的制備主要包括以下步驟:
免疫:將特定抗原注射到小鼠體內,激發其免疫系統產生抗原特異性抗體。
融合:從免疫小鼠體內提取脾細胞和骨髓細胞,與鼠髓瘤細胞(如SP2/0或NS0細胞)進行細胞融合,形成雜交瘤細胞(hybridoma)。
篩選:通過培養基中的選擇性物質,篩選出雜交瘤細胞并進行克隆化,得到單克隆細胞株。
培養和收獲:將單克隆細胞株培養在培養基中,使其不斷增殖。當培養基內的抗體達到一定濃度時,收獲培養上清液。
純化和鑒定:使用親和層析、離心、超濾等方法對培養上清液進行純化,獲取純化的單克隆抗體。同時,可以通過免疫電泳、Western blot等技術進行鑒定,確保所得抗體具有特定的抗原結合活性。

整個過程中,關鍵的一步是雜交瘤細胞的融合,它使得不穩定的抗體產生細胞克隆,保證了后續大量高效的抗體產生。這種制備方法可用于制備高度特異性和高親和力的單克隆抗體,以滿足科學研究、生物藥物開發等領域的需求。
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