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單克隆抗體制備流程圖

日期:2023-06-01 15:03:46


    單克隆抗體的制備流程是一系列復(fù)雜而精細(xì)的實驗操作,下圖是單克隆抗體制備的基本流程圖。

    抗原準(zhǔn)備:制備純度高、結(jié)構(gòu)完整的抗原,可以是蛋白、多肽、糖或細(xì)胞表面分子等。
 
    免疫動物免疫:將抗原和適當(dāng)劑量的佐劑混合,注射到實驗動物體內(nèi),激發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗原特異性抗體。
 
    細(xì)胞融合:收集動物骨髓細(xì)胞、脾細(xì)胞等,與腫瘤細(xì)胞(如骨髓瘤)進(jìn)行細(xì)胞融合,得到一組具有免疫力的雜交瘤細(xì)胞。


打克隆抗體制備

 
    雜交瘤篩選:采用雙倍體選擇培養(yǎng)基對細(xì)胞進(jìn)行篩選,保留僅產(chǎn)生單一種類單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。
 
    單克隆抗體生產(chǎn):將單克隆雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行擴增培養(yǎng),收集上清液和細(xì)胞沉淀,分離和純化抗體。
 
    鑒定和表征:對單克隆抗體進(jìn)行鑒定和分析,包括抗原特異性、亞型、親和力等的評估。
 
    應(yīng)用和開發(fā):將單克隆抗體應(yīng)用到特定領(lǐng)域的實驗或臨床診斷中,或進(jìn)行技術(shù)開發(fā)和優(yōu)化,制備不同類型和特性的單克隆抗體。


抗體制備


    單克隆抗體制備是一項高度復(fù)雜和精細(xì)的實驗過程,需要在多個操作步驟中進(jìn)行有效控制,以獲得高質(zhì)量、高效率的單克隆抗體產(chǎn)物。該流程圖僅為單克隆抗體制備的基本流程,具體操作步驟根據(jù)所使用的免疫動物種類、抗原類型、雜交瘤選擇、抗體純化方法等因素而有所不同。

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