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CNR1(CB1):內源性大麻素系統ECS經典受體,為糖脂代謝和腫瘤注入全新研究價值!

日期:2023-09-08 11:43:55


最近,丹麥諾和諾德(Novo Nordisk)宣布計劃以高達10.75億美元的價格收購加拿大生物技術公司Inversago Pharma,以獲取其基于CB1受體(CB1R)的創新療法INV-202。這項收購將進一步強化Novo Nordisk在減重領域的戰略布局,該公司已擁有了一款強勁的靶向GLP-1R的減重藥物Wegovy。INV-202是一種口服CB1R拮抗劑,可以阻斷CB1R的活化,從而減少食欲、降低體重、改善血糖和血脂等。

更加令人振奮的是,多款針對CNR1(CB1R/CB1)的藥物在腫瘤治療方面也逐漸顯現出潛力。例如,Rimonabant正處于II期臨床試驗中,用于治療晚期胃癌,同時AM251也正在進行I期臨床試驗,以應用于晚期乳腺癌治療。因此,CB1R作為經典大麻素受體,越來越多的制藥公司對這個靶點表現出濃厚興趣,以探索其在治療腫瘤和其他代謝疾病方面的潛力!


1. 什么是內源性大麻素系統ECS?

內源性大麻素系統(Endocannabinoid system,ECS)是最重要的能夠維持機體內環境穩定的生理系統之一,也是重要的脂質代謝平衡調控因子。ECS主要包括內源性大麻素(AEA、2-AG)及其衍生物,大麻素受體(CNR1、CNR2)及非經典大麻素受體(eg. PPARGPR55),各種代謝酶組成(eg. FAAHMAGL)。ECS成員廣泛分布在全身各種組織,如大腦,免疫細胞,結締組織等。ECS與神經作用、炎癥發生、纖維化、疼痛調節等一系列病理生理過程密切相關,參與調控能量代謝,控制胰島素分泌,維持血脂水平及性激素調控等。近期針對ECS的研究主要圍繞它在能量平衡、自體免疫和抗腫瘤中發揮的作用,其中,大麻素受體CNRl的抗腫瘤作用是最近研究的熱點 [1-2]


2. 什么是大麻素Ⅰ型受體基因(CNR1)?

2.1 CNR1的結構

大麻素Ⅰ型受體(Cannabinoid receptor 1,CB1R或CB1、CNR1)作為內源性大麻素信號系統最經典的受體之一,是一種G蛋白耦聯的膜受體。CNRl基因位于6q14-q15染色體,包含4個外顯子和3個內含子,編碼的蛋白CB1R由473個氨基酸組成,N端117位氨基酸形成胞外區,C端401-473位氨基酸構成胞內區,中間有七次跨膜(圖1[3]。胞外區還含有七次跨膜形成的三個親水性結構域:e1、e2及e3,其中e2被認為是與大麻類物質結合的功能域。大麻素類物質作用于CNR1后,會激活多重細胞內信號轉導通路,發揮各種生理和病理功能 [4]

2.2 CNR1的表達和功能

CNR1被克隆和鑒定的最初,一直被認為其僅在腦中表達。但是大量的后續研究揭示,其不僅在腦中表達,同樣在外周的細胞和組織中也表達,比如肺、肝臟、腎、消化道、脂肪組織和骨骼肌 [5-6]。CNR1通過大麻素及其衍生物刺激或結合,激活胞內信號,介導ECS發揮廣泛而復雜的生物學作用。例如,CNR1對記憶、認知、運動、情緒等有重要的調節作用;CNR1對腺苷酸環化酶系統中的第二信使AMP水平進行調控,從而影響細胞功能、物質代謝、免疫功能和基因表達等;CNR1還通過細胞內鈣調蛋白系統調整鈣離子水平,鈣離子在細胞功能中具有關鍵作用,包括影響信號傳導、腫瘤發展以及細胞自噬等 [7-8]。近年來,這一系列的發現為CNRl這一發現已逾30年的經典蛋白注入全新的研究價值!

CNR1的結構

圖1. CNR1的結構 [3]


3. CNR1相關的信號通路

3.1 CNR1抑制G蛋白偶聯受體信號機制

目前,CNR1(CB1R)作為抑制性G蛋白偶聯受體家族成員,其信號轉導機制已經得到相對清晰的研究。大麻素受體作用機制主要通過調控G蛋白介導胞內第二信使環磷酸腺苷的產生、鈣離子通道、絲裂原活化蛋白激酶MAPKs的活性等相關信號傳導通路(圖2[9]。以內源性大麻素(Endocannabinoid,EC)的激活作用為例進行說明。

在腦內,EC作為一種逆向性神經遞質,從突觸后神經元釋放,并作用于突觸前膜,從而引發CB1R產生一系列效應。CB1R被激活后,通過Gi/o蛋白信號轉導途徑,抑制腺苷酸環化酶的活性,降低細胞內cAMP水平。此外,CB1R還通過調節離子通道的活性,促進鉀離子(K+)外流,降低細胞內鉀離子(Ca2+)水平,并抑制L、N、P/Q型電壓依賴性Ca2+通道的活性,降低細胞內Ca2+水平,進而減少突觸前膜神經元內γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸等神經遞質的釋放 [9]

該過程還導致CB1R被磷酸化并激活絲裂原激活蛋白激酶,磷酸化的CB1R與β-arrestin分子緊密聯系,參與調節G蛋白偶聯受體信號。此外,在特定環境中,CB1R還能通過Gs蛋白信號途徑激活腺苷酸環化酶,增加細胞內cAMP含量。再者,CB1R還能通過Gq蛋白信號途徑激活Gq偶聯的胞內鈣離子通道,這種效應具有細胞選擇性。CB1R介導的藥理效應在不同組織中存在差異,可能是因為CB1R能夠與其他受體形成寡聚體/二聚體結構 [9-10]

CNR1抑制G蛋白偶聯受體信號機制

圖2. CNR1抑制G蛋白偶聯受體信號機制 [9]

3.2 CNR1協同大麻素系統的抗腫瘤機制

大麻素系統在抗癌作用上機制十分復雜。一般認為,大麻素通過與細胞膜上的受體CNRl(CB1)或CNR2(CB2)結合,導致細胞內神經酰胺合成增加,從而激活ERK通路、p38MAPK、PI3K/PKB信號通路,促進細胞凋亡 [11]。此外,大麻素與受體結合后還能通過ERK和PI3K/PKB信號通路激活P27/KIP1、Cyclins、Cdks信號通路,從而抑制細胞增值 [12]。另外,大麻素與受體CNRl或CNR2結合抑制AKT/PKB磷酸化以及MMP-2MMP-9的分泌,從而抑制腫瘤細胞的遷移 [13-14]

CNR1協同大麻素系統的抗腫瘤機制

圖3. CNR1協同大麻素系統的抗腫瘤機制 [11]


4. CNRl在疾病中的作用

4.1 CNR1與腫瘤

CNR1(CB1R)在不同腫瘤中的作用廣泛而復雜。CNR1在多種腫瘤中表達上調,包括前列腺癌 [15]、胰腺癌 [16]、霍奇金淋巴瘤 [17]、腎透明細胞癌 [18]和腎嗜酸細胞癌 [19]等,然而,在低分化肝細胞癌及結腸癌中表達下調 [20-21]。在胰腺癌中,低表達CNR1的患者疼痛較輕,預后較好 [16];在前列腺癌中,高表達CNR1與前列腺腫瘤惡性程度高及預后差相關 [15];但是,在肝癌中,高表達CNR1患者預后較好 [20]。因此,CNR1在不同腫瘤發生發展中的作用仍然需要深入探索。

CNR1還與腫瘤的生長、血管發生和遷移有關,可發揮抗癌作用。目前所有圍繞內源性大麻素系統抑癌作用的研究都是利用大麻素類似物—大麻素激動劑來完成的。在人類乳腺癌肺轉移鼠模型中應用大麻素受體激動劑(JWH133和Win55, 212-2)可抑制原發腫瘤的生長,降低肺轉移病灶的大小和數量 [22-23]。在雄激素抵抗的PC-3前列腺癌細胞鼠模型中,在腫瘤周圍直接注射JWH015能明顯縮小腫瘤 [24]。大麻素可通過損害機體抗腫瘤免疫能力,促進IL-4IL-10等分泌,進而促進乳腺癌的發生發展 [25]。在黑色素瘤和腎癌研究中,CNR1特異性抑制劑AM251可明顯抑制腫瘤細胞的增殖,促進腫瘤細胞的凋亡與G2/M周期阻滯 [26-27]

4.2 CNR1與糖脂代謝相關疾病

CNR1(CB1R)過表達會影響許多疾病,例如肥胖、代謝綜合征、糖尿病、脂肪肝等 [28-32]。利莫那班(Rimonabant)是CNR1選擇性受體拮抗劑,通過減低中樞神經系統受體的活性,從而降低患者的食欲、進食量、減少肝內脂肪生成等。同時,Rimonabant可通過抑制外周組織(如骨骼肌、脂肪組織等)受體的過度表達,發揮著減肥作用,并且改善胰島素抵抗和脂肪組織的代謝。該抑制劑在臨床上已被廣泛用于減肥治療,可有效改善與肥胖癥相關疾病的危險因素 [33-34]

關于抑制CB1R后產生上述效應的具體機制仍不清楚。有研究指出,CB1受體抑制劑可以改善胰島素抵抗,其機制可能是激活受體CB1R可使肝臟脂肪合成轉錄因子固醇調節元件結合蛋白-lc、乙酰輔酶A羧化酶-1和脂肪酸合成酶基因表達增高,引起小鼠肥胖 [35]。過高的脂肪酸水平會使胰島素刺激的葡萄糖攝取功能受損,導致血糖升高,慢性高血糖引起胰島B細胞功能的減退。總之,激動CB1R可以增加體重,升高血脂,加重胰島素抵抗和使胰島B細胞功能減退,抑制CB1R可逆轉此效應,這為糖脂代謝相關疾病的治療提供了新的思路。

4.3 CNR1與其它疾病

此外,CNR1在情感障礙、抑郁癥、腸道疾病、銀屑病和疼痛方面的作用也受到了一些關注 [36-40]。一些研究發現,CNR1基因的變異或是抑郁癥發生的風險因素,尤其是在女性和年輕人中 [41];CNR1還在調節腸道的運動、分泌、感覺和免疫反應方面發揮著重要的作用,這些方面都與腸易激綜合征和潰瘍性結腸炎的發病機制有關 [37];銀屑病患者血清和皮損組織中CNR1和CNR2表達升高,且與患者病情嚴重程度有關 [38];此外,CNR1激動劑對神經性疼痛、癌癥相關疼痛和其他慢性非癌性疼痛有一定的鎮痛效果,但也有一些不良反應,如精神障礙、惡心和嗜睡等 [39-40]


5. CNR1的臨床藥物研究前景

目前,全球已經上市了兩種基于CNR1的靶向藥物,用于治療肥胖、癌癥疼痛等多種疾病。特別值得一提的是,大麻二酚/四氫大麻酚(Cannabidiol/Dronabinol)藥物已獲得歐盟認定為孤兒藥資格。目前,CNR1已有100多個臨床在研項目,這些CNR1相關藥物主要包括小分子化合物,單克隆抗體和診斷用放射藥物等。CNR1作為參與多種生理功能的大麻素受體,如情緒、食欲、脂質代謝、認知和疼痛等,其臨床研究領域涵蓋內分泌、神經、皮膚、代謝、腫瘤等多個領域。在這些領域,研究人員主要利用CNR1的拮抗劑、反向激動劑、激動劑或調節劑來治療各種疾病,如肥胖、糖尿病、疼痛、焦慮、惡病質、藥物中毒、腫瘤等。隨著對CNR1的深入了解和創新藥物的不斷開發,CNR1已成為治療腫瘤和其他代謝疾病的重要靶點之一!

為鼎力協助科研和藥企人員針對CNR1在多種糖脂代謝相關疾病和腫瘤中的臨床應用研究,CUSABIO推出CNR1活性蛋白(Code: CSB-MP005678HU),助力您在CNR1機制方面的研究或其潛在臨床價值的探索。

Cannabinoid receptor 1(CNR1)蛋白

Recombinant Human Cannabinoid receptor 1(CNR1)-VLPs (Active)

High Specifity Validated by SDS-PAGE
CSB-MP005678HU WB

The high specifity is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA
High Purity Validated of CSB-MP0172MP005678HU60HU1

Immobilized Human CNR1 at 10 μg/ml can bind Anti-CNR1 recombinant antibody (CSB-RA005678MA01HU), the EC50 is 41.72-63.54 ng/mL.


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