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CLDN6:癌癥治療新寵,晚期實體瘤患者的福音

日期:2024-10-31 15:39:00


2024年9月,第一三共發布了DS-9606的I期臨床試驗結果。DS-9606是一種基于ADC平臺開發的靶向CLDN6的抗體偶聯藥物,在I期臨床試驗的劑量遞增階段顯示出對已知表達CLDN6的晚期實體瘤患者良好的臨床活性和耐受性,未觀察到劑量限制性毒性,且在≥0.072 mg/kg劑量組中有4例患者達到確認的客觀緩解,研究結果令人鼓舞,將繼續推進以確定劑量擴展階段的推薦劑量,并進一步評估其在晚期實體瘤中的療效。

CLDN6作為Claudins家族的一員,被認為是繼CLDN 18.2之后,下一個癌癥治療的“新寵”

1、Claudins家族的發現

Claudins(CLDNs)蛋白家族最早在1998年由Furuse Mikio等人從雞肝中克隆得到并為之命名,是緊密連接(Tight junctions,TJs)的重要組成部分 [1-2]。緊密連接主要由occludin,CLDNs,緊密連接黏附分子構成。在哺乳動物中,迄今為止發現了27個Claudins成員,隨著研究的深入,Claudins家族成員還將不斷壯大 [3-4]。大量研究已證實,Claudins家族是TJs必不可少的骨架蛋白,在維持上皮和內皮細胞中的細胞極性、細胞間的粘附固定、細胞旁路的離子運輸等方面發揮重要作用 [5-8]

Claudins成員,廣泛分布于不同的組織器官中,其表達具有多樣化的特性。近年來的大量研究數據揭示,Claudins的異常表達與多種腫瘤相關,涌現出更多的Claudins家族潛力靶點,用于腫瘤臨床診斷和治療(圖1[9]。不僅在癌癥中扮演重要角色,也同其它疾病息息相關。例如,CLDN1的異常表達可導致硬化性膽管炎和魚鱗病 [10-11]CLDN3的增加與肺泡屏障功能降低有關 [12]。在癌癥免疫治療領域,Claudins家族成員CLDN18的異構體CLDN18.2,已成為藥企必爭靶點的高地(點擊查看CLDN18.2相關文章)。如今,CLDN6作為Claudins家族“新寵”,腫瘤靶向藥物的研發也是勢如破竹,令人期待!

Claudins靶向藥物的臨床應用

圖1. Claudins靶向藥物的臨床應用 [9]

2、什么是CLDN6?

CLDN6作為27個CLDN家族成員之一,是組成細胞間緊密連接的重要分子。CLDN6位于染色體16p3.3,分子量大約20-40kDa。Claudins成員之間具有相似的結構,每個Claudin分子有4個跨膜結構域,2個細胞外環和2條胞內尾區。CLDN6擁有一個C端的PDZ結合位點,使得緊密連接蛋白能與細胞內某些蛋白發生相互作用關系,在細胞連接及上皮組織通透性等方面均可發揮重要作用(圖2[13]。對CLDN6蛋白質分子結構的研究是進一步了解CLDN6分子特性和功能的前提和基礎,目前關于CLDN6的高級結構的研究尚處于初級階段。然而值得關注的是,越來越多的研究表明,CLDN6異常表達可參與乳腺癌 [14],卵巢癌 [15],宮頸癌 [16],胃癌 [17],肺癌 [18]等多種惡性腫瘤發生及發展過程。

由于腫瘤細胞易于侵襲轉移,細胞之間結構較正常細胞排列錯亂,導致細胞信號因子或者藥物在流動過程中阻力增加,難以突破細胞間的屏障到達腫瘤細胞內,抗腫瘤藥物無法髙效發揮作用。因此,探索打開細胞緊密連接,為抗腫瘤藥物以及正常信號通路的轉導清除障礙,成為腫瘤治療中的新思路。CLDN6作為細胞骨架的形成和細胞信號通路調節的重要分子,可影響細胞的生長進程,這為腫瘤的診斷和干預提供了新的方向。目前,多款針對CLDN6的藥物已處于臨床和臨床前階段,用于多種腫瘤的治療。

CLDNs家族結構示意圖

圖2. CLDNs家族結構示意圖 [13]

3、CLDN6相關的信號通路

目前的研究普遍認為,CLDN蛋白表達升高或降低,磷酸化及去磷酸化,都會導致一定程度的細胞極性缺失和細胞間分子異常擴散等變化,而此種變化的主要原因則是由于緊密連接正常結構的破壞而引發的。另外,CLDN蛋白可能是通過高度特異性的胞內信號通路所起作用的,但目前絕大多數CLDN蛋白在腫瘤中的作用機制尚不清楚。大量研究表明,CLDN6基因可能直接或間接參與腫瘤細胞增殖、分化、凋亡等功能的調節 [19]

CLDN6可以通過不同的信號通路參與細胞調控,其復雜多樣的分子機制有待進一步闡明。比如,在宮頸癌細胞中,CLDN6的PDZ結合基序可以募集具有PDZ結構域的蛋白AF-6,AF-6與Ras結合,抑制Ras和Raf的結合,使得Ras不能被Raf激活,從而抑制Ras的活性,進一步抑制下游靶分子如ERKPI3K等信號通路,以調控細胞生物學行為 [13]。在乳腺癌中,過表達CLND6可以激活ASK1/P38通路,從而誘導細胞凋亡 (圖3);在肺腺癌中,CLDN6過表達細胞,可促進P38 MAPK途徑的活化 [14] ;在結直腸癌中,CLDN6通過與ZO-1結合,調控PTEN/AKT信號通路,抑制腫瘤 [20];在卵巢癌中,CLDN6通過ASK1參與細胞凋亡,進而介導MAPK信號通路發揮作用 [15]

CLDN6J激活RIP1-ASK1-p38/JNK MAPK

圖3. CLDN6激活RIP1-ASK1-p38/JNK MAPK [19]

4、CLDN6在腫瘤等疾病中的作用

CLDN6等家族蛋白,在上皮細胞和內皮細胞緊密連接的形成過程中起了重要作用。CLDN家族通過細胞屏障、細胞旁路轉運和信號轉導保持了細胞內環境的平衡。CLDN6等家族蛋白的異常表達,可使得TJs功能受損,屏障功能降低,從而導致組織通透性提高,最終導致包括遺傳性、過敏性疾病,各個系統感染性疾病乃至腫瘤等多種疾病的發生。目前,關于CLDN6的研究,主要集中在腫瘤,尤其是卵巢癌,乳腺癌,宮頸癌。

4.1 CLDN6和腫瘤

在一項產氣莢膜梭菌腸毒素(CPE)結合CLDN6調控卵巢癌的研究數據顯示,CLDN6在卵巢癌中高表達,CPE可加速卵巢癌細胞裂解;CLDN6編碼基因的敲除,可降低CPE高敏感株對CPE的敏感度,使得CPE無法破壞腫瘤細胞,導致腫瘤增殖;而CLDN6過表達,可增加抗CPE細胞株對CPE的敏感度,促使腫瘤細胞裂解 [21]。在人乳腺癌細胞系中CLDN6低表達,當過表達CLDN6時,MDA-MB-231細胞的運動性顯著降低,并顯示出侵襲性降低,緊密連接功能隨著菌落變得更緊密而增強;進一步數據顯示,CLDN6的高表達,可導致Sp1和cyclin D1的表達下調 [22-23];另有研究表明,過表達CLDN6的宮頸癌細胞中,促凋亡蛋白Bax增多,抑凋亡蛋白Bcl-2Bcl-xl減少,這提示,CLDN6具有促進宮頸癌細胞凋亡的作用 [13, 24]。因此,CLDN6有望為卵巢癌等腫瘤靶向治療提供新方向。

4.2 CLDN6和多卵巢綜合征等疾病

有研究證實,CLDN6在多囊卵巢綜合征(Polycystic Ovary Syndrome,PCOS)和顆粒細胞(Granular Cells,GC)中呈高表達,減弱CLDN6表達,可抑制PCOS大鼠卵巢GC增殖并誘導GC凋亡 [25, 26]。PCOS以月經稀發、高雄激素血癥、卵巢多囊樣改變為主要特征,影響全球5%~20%的育齡婦女。患有PCOS的女性中,GC異常增殖,并與卵巢內雄激素的過量產生有關。另有研究報道,抑制CLDN6表達,可抑制子宮內膜異位癥細胞增殖、遷移及侵襲。子宮內膜異位癥是臨床常見婦科疾病且育齡女性的發病率較高,患者常有月經量過多、痛經等癥狀。以上研究意味著,CLDN6可能作為治療PCOS或子宮內膜異位癥的潛在靶點。

5、CLDN6臨床研究進展

來自ParmSnap數據庫顯示,已有10多家企業布局CLDN6研發管線,集中在CLDN6抗體、ADC、雙特異性抗體、CART(參見下表)。具體來看,針對CLDN6藥物進展較快的,來自日本安斯泰來制藥(Astellas Pharma Global Development, Inc.)旗下的IMAB-027抗體藥物,為靶向CLDN6的抑制劑,已處于臨床二期,適應癥包括生殖細胞和胚胎腫瘤、睪丸腫瘤、卵巢癌,但尚未查到該項目的2期臨床數據。

安進公司的AMG 794雙特異性抗體,靶向CD3 x CLDN6,處于臨床1期,適應癥為卵巢上皮癌、非小細胞肺癌,以及非鱗狀非小細胞肺癌。在2022 AACR會議上,安進公司披露AMG 794對表達CLDN6的非小細胞肺癌和上皮性卵巢癌細胞,具有可接受的臨床前安全性數據,支持AMG 794進入臨床開發。

德國拜恩泰科公司旗下有三款管線藥物在研BNT 211(臨床2期)、BNT-142(臨床1/2期)和CARVac Claudin6 mRNA vaccine(臨床1期)。在AACR會議上,德國拜恩泰科披露了BNT211 CAR-T+CARVac聯合治療CLDN6陽性實體瘤的臨床初步數據,在16名接受治療患者中,CLDN6 CAR-T治療具有良好的耐受性,疾病控制率達到86%,客觀緩解率ORR為43%。

另外,4款雙特異性抗體藥物尚處于臨床前階段,分別來自Context Therapeutics LLC(CLDN6 x CD3),Novarock Biotherapeutics Ltd.(NBL-028;TNFRSF9 x CLDN6),天境生物(TJ-C64B;TNFRSF9 x CLDN6)、Integral Molecular, Inc.聯合Context Therapeutics LLC(IM-171,CLDN6 x CD3)。其中Novarock為石藥集團的附屬公司,旗下的NBL-028的臨床前數據表明,NBL-028在小鼠模型中能夠有效抑制腫瘤并誘導免疫記憶的形成,且未檢測到肝損傷或全身毒性的跡象。

隨著越來越多的對緊密連接蛋白家族研究,CLDNs家族與腫瘤相關的分子機制和藥物研究正成為熱點和重點。繼CLDN18.2之后,CLDN6同樣作為緊密連接蛋白關鍵成員,CLDN6異常表達在卵巢癌等多種惡性腫瘤中扮演重要角色,尤其婦科腫瘤。利用CLDN6的空間結構和調節特點,尋找或設計針對CLDN6靶向藥物,去主動調控CLDN6的信號轉導,干擾腫瘤的進程,對于卵巢癌等腫瘤的早期診斷和精準治療具有重要的價值!

為鼎力協助各藥企針對CLDN6靶點在卵巢癌等腫瘤藥物方面的研發工作,CUSABIO推出CLDN6四次跨膜蛋白活性產品(Code: CSB-MP005508HU(A4)),助力您在CLDN6機制方面的研究或其潛在臨床價值的探索。

Recombinant Human Claudin-6(CLDN6)-VLPs (Active)

High Specifity Validated by Western Blot

The specifity was validated by western blot. CSB-MP005508HU(A4) is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

Immobilized Human CLDN6 at 10 μg/ml can bind Anti-CLDN6/9 recombinant antibody (CSB-RA005508MA1HU), the EC50 is 1.501-2.035 ng/mL

TEM

The presence of VLP-like structures was confirmed by TEM

Recombinant Chlorocebus sabaeus Claudin (CLDN6)-VLPs (Active)

High Specifity Validated by Western Blot

CSB-MP025131HU is detected by Mouse anti-6*His monoclonal antibody.

Excellent Bioactivity Validated by Functional ELISA

Measured by its binding ability in a functional ELISA. Immobilized Macaca fascicularis CLDN6 at 5 μg/ml can bind Anti-CLDN6/9 recombinant antibody (CSB-RA005508MA1HU). The EC50 is 4.186-6.635 ng/mL.The VLPs (CSB-MP3838) is negative control.

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