不容錯(cuò)過的標(biāo)簽抗體！

日期：2018-11-22 13:46:05

標(biāo)簽抗體（Tag Antibody）

標(biāo)簽抗體，別名為抗原表位，又稱抗原決定簇，是抗原分子中決定抗原特異性的特殊區(qū)域或基團(tuán)，是與抗體特異性結(jié)合的結(jié)構(gòu)或序列。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，科研人員可以通過DNA重組技術(shù)，構(gòu)建包含目的基因以及表位標(biāo)記的融合蛋白，進(jìn)而通過特異性標(biāo)簽抗體對(duì)其鑒定與純化，以達(dá)到研究的需求。

隨著生物技術(shù)的發(fā)展，研究人員常利用DNA重組技術(shù)構(gòu)建包含目的基因以及表位標(biāo)記的融合蛋白，進(jìn)而通過特異性標(biāo)簽抗體對(duì)其鑒定與純化，以達(dá)到研究的需求；同時(shí)利用重組雜合體中含有一個(gè)多肽融合單體（親和標(biāo)簽）這一特性，其也被廣泛用于輔助目標(biāo)蛋白的純化。總之標(biāo)簽抗體是開展基因蛋白表達(dá)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因功能研究的常用工具。

標(biāo)簽抗體（Tag Antibody）可用于檢測和純化各種商品化表達(dá)載體上的標(biāo)簽序列，籍以分析檢目的蛋白的表達(dá)含量及其功能。其原理是抗原—抗體反應(yīng)，這些標(biāo)簽抗體可以高度特異地結(jié)合對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽融合蛋白。

常用標(biāo)簽包括：Flag、Myc、HA、His、GST、MBP等。

Flag標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)短的親水性八氨基酸肽（DYKDDDDK）融合到目標(biāo)蛋白；其純化條件是非變性的，因此可以純化所有有活性的融合蛋白。

Myc標(biāo)簽（序列為：EQKLISEEDL）已成功應(yīng)用于WB雜交技術(shù)、免疫沉淀IP和流式細(xì)胞術(shù)中。因此可用于檢測重組蛋白在細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳細(xì)胞中的表達(dá)情況。Myc重組蛋白質(zhì)可通過偶聯(lián)Myc標(biāo)簽抗體到二乙烯砜活化的瓊脂糖上而進(jìn)行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會(huì)降低蛋白質(zhì)的活力，因此Myc標(biāo)簽系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于檢測但很少用于純化。

HA標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)HA（influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA）短肽融合到目標(biāo)蛋白。HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端，該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞類型，相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛運(yùn)用。

His標(biāo)簽是由6個(gè)組氨酸（His-His-His-His-His-His）組成的短肽，專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白的吸附純化。由于分子量小，且較容易分離和純化，是目前使用最廣泛的一種。

GST標(biāo)簽體系具有蛋白表達(dá)率高，表達(dá)產(chǎn)物純化方便，利于GST抗體制備的特點(diǎn)。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細(xì)菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到。

MBP（麥芽糖結(jié)合蛋白）標(biāo)簽蛋白大小為40kDa，由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在細(xì)菌中表達(dá)，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗體或表達(dá)的目的蛋白特異性抗體檢測MBP標(biāo)簽標(biāo)記的重組蛋白。

華美標(biāo)簽抗體特別推薦

Myc tag Monoclonal Antibody

貨號(hào)：CSB-MA000041M0m

種屬反應(yīng)性：All

免疫原：EQKLISEEDL (Myc) synthetic peptide conjugate to KLH

應(yīng)用范圍：ELISA, WB, IF, IP

引用文獻(xiàn)：The double-edged sword of endoplasmic reticulum stress in uremic sarcopenia through myogenesis perturbation , Jheng JR,et al. J Cachexia Sarcopenia Muscle,Jan 29(IF=12.511)