免疫電泳（immunoelectrophoresis ）是將電泳和瓊脂擴(kuò)散結(jié)合起來(lái)，用于分析抗原組成的一種定型方法，具有靈敏快速的優(yōu)點(diǎn)。該實(shí)驗(yàn)可分為如下兩個(gè)步驟：

1.電泳 將待檢的可溶性物質(zhì)在瓊脂板上進(jìn)行電泳分離。由于各種可溶性蛋白分子的大小、質(zhì)量與所帶電荷不同，在電場(chǎng)的作用下，其帶電分子的運(yùn)動(dòng)速度具有一定的規(guī)律，因此通過(guò)電泳能夠把混合物中的各種不同成分分離開(kāi)。

2.瓊脂擴(kuò)散 電泳后在瓊脂槽中加入相應(yīng)抗血清，然后置濕盒內(nèi)進(jìn)行雙擴(kuò)散。當(dāng)抗原與抗體相遇且比例適合時(shí)，可形成不溶性復(fù)合物，出現(xiàn)特異性沉淀線，根據(jù)沉淀線的數(shù)量和位置，可鑒定分析各種抗原成分及其性質(zhì)。

【材料】

1.抗原：正常人血清；抗體：兔抗人血清。

2.1% 離子瓊脂（用離子強(qiáng)度 0.05 、pH8.6 的巴比妥緩沖液配制）。

3.載玻片、直徑 3mm 的打孔器、2 × 6 × 6 聚苯乙烯塑料條、微量加樣器、電泳儀、吸管等。

【方法】

1.制瓊脂板 載玻片放于水平臺(tái)面上，將塑料條放置于玻片中央，吸取 4ml 熱熔的 1% 離子

瓊脂于其上，待凝固后，取出塑料條，即制成瓊脂槽。再按圖 6-2 打孔。

2.加樣 用微量加樣器往孔中加正常人血清。

3.電泳 電壓 4V/cm ，電泳 1.5 小時(shí)。

4.瓊脂擴(kuò)散 在瓊脂槽內(nèi)加入兔抗人血清，使其充滿槽內(nèi)，置濕盒內(nèi) 3 7 ℃ 擴(kuò)散 24 小時(shí)，觀察結(jié)果。

【結(jié)果觀察】

在瓊脂槽的兩邊出現(xiàn)相對(duì)稱的弧形沉淀線。

【注意事項(xiàng)】

1.電泳擴(kuò)散后可直接在黑色背景下，用斜射光觀察。

2.電泳時(shí)，搭橋應(yīng)完全緊密接觸，以免因電流不均而發(fā)生沉淀線彎曲。