自然通訊:讓RNA分析更容易的新工具
日期:2014-12-05 09:11:31
最近,由美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究所(NIST)開發(fā)的一種新的創(chuàng)新型“儀表板”,它不會幫你開車,但是卻有助于生物學(xué)中的重復(fù)性研究。
在《自然通訊》(Nature Communications)發(fā)表的一篇論文中,一個國際多實驗室團隊演示了一種新的軟件工具——erccdashboard,來評估用以研究基因表達的實驗方法的性能。
該分析工具被設(shè)計為,與NIST主持的External RNA Controls Consortium(ERCC)開發(fā)的RNA spike-in對照一起使用。這些ERCC對照是由External RNA對照(2013年由機構(gòu)發(fā)行,標(biāo)準(zhǔn)參考資料2374)DNA序列實驗室產(chǎn)生。
本文第一作者Sarah Munro稱:“在基因表達實驗中,科學(xué)家們試圖通過同時量化基因組表達的幾千個RNA分子,來了解細胞的生物活性如何由包含在其基因組中的遺傳信息而引起。”
Munro說,由erccdashboard提供的驗證,是確保這些復(fù)雜實驗的重復(fù)性所必不可少的。她解釋說:“基因表達實驗的結(jié)果往往被用來做出醫(yī)療決定,例如識別哪種藥物對于特定患者是最好的。我們的新軟件工具,可以使研究人員測量這種方法用于任何實驗的性能,評估實驗隨時間推移、在實驗室之間的重復(fù)性和再現(xiàn)性,并確認這些結(jié)果是可信的。”
Erccdashboard提供了第一種標(biāo)準(zhǔn)化的方法,用于任何實驗室來評估基因表達分析的質(zhì)量。ERCC spike-in控制材料來自于NIST SRM 2374,由96種不同的DNA分子組成,每種都有一段特定認證的基因序列。該DNA產(chǎn)生的不同RNA分子,可以混合成確定比例的“雞尾酒”,然后用來“spike”RNA分子的生物樣品。RNA "spike-in"分子作為對照,來檢測實驗的技術(shù)性能。為了避免干擾由樣品RNA分子組成的測量,ERCC對照RNA序列,旨在與許多研究人員研究的各種哺乳動物細胞(例如人類或小鼠細胞)中發(fā)現(xiàn)的RNA序列不同。
Munro說,此前,沒有標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)方法來分析基因表達實驗中所獲得的數(shù)據(jù)。她解釋說:“ERCC對照材料,使我們新的驗證工具——erccdashboard的發(fā)展成為可能。”
Munro說,新的NIST軟件,為生物學(xué)家評估任何基因表達實驗,提供了一種簡單的“交鑰匙”機制。她說:“它的性能指標(biāo),被設(shè)計成不依靠實驗所用測量技術(shù)的類型,所以當(dāng)技術(shù)隨著時間的推移而提高時,結(jié)果還可以進行比較。利用dashboard,將使重復(fù)性研究成為可能,并防止研究人員從低質(zhì)量的實驗數(shù)據(jù)得出錯誤的結(jié)論。”
Munro說,開發(fā)dashboard的NIST團隊下一個目標(biāo)是,將這種軟件應(yīng)用到分析ERCC目前正在研發(fā)的一組新RNA對照分子。最終,該團隊計劃把這種工具的使用范圍擴展到蛋白質(zhì)測量。






